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發(fā)布時間：2021-03-29 23:09 人氣： 來源：
,式中：X1――細菌菌落數(shù)量，cfu/g或cfu/mL；, A
――5塊瓊脂培養(yǎng)液版本上的細菌菌落數(shù)量；, K
――稀釋液度。,當菌體數(shù)在100之內(nèi)，按實有數(shù)報告，超過100時才有二位有效數(shù)字。,假如試品菌落總數(shù)超出本規(guī)范的要求，按B2.3開展復查和結(jié)果報告。,B2.3
復查方式,將存留的復查試品依前法進行復測2次，2次結(jié)果均值都做到本規(guī)范的要求，則判斷被檢試品達標；在其中有一切1次結(jié)果均值超出本標準，則判斷被檢試品不過關(guān)。,B3
大腸桿菌檢驗方式,B3.1
操作流程,抽樣液5mL，打疫苗五十米L乳清蛋白膽鹽發(fā)醇管，置35℃±2℃塑造24小時，如不產(chǎn)酸都不脹氣，則報告為大腸桿菌呈陰性。,如產(chǎn)酸脹氣，則畫線打疫苗伊紅美藍瓊脂平板電腦，置35℃±2℃塑造18-24小時，觀查平板電腦上菌體形狀。典型性的沙門氏菌落為紫黑色或紅紫色，環(huán)形，邊沿齊整，表層光潔潮濕，常具備金屬質(zhì)感，也是有的呈紫黑，沒有或有點金屬質(zhì)感，或淡粉色，管理中心較深的菌體。,取疑是菌體1-2個作革蘭氏染色鏡檢查，另外打疫苗乳清蛋白發(fā)醇管，置35℃±2℃塑造24小時，觀查脹氣狀況。,B3.2
結(jié)果報告,凡乳清蛋白膽鹽發(fā)醇管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，乳清蛋白發(fā)醇管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，在伊紅美藍平板電腦上面有典型性沙門氏菌落，革蘭氏染色為呈陰性無枯草芽孢菌，可報告被檢試品驗出大腸埃希菌。,B4
綠膿桿菌檢驗方式,B4.1
操作流程,抽樣液5mL，添加到五十米L SCDLP細胞培養(yǎng)液中，充足攪拌，置35℃±2℃塑造18-24小時。若有綠膿桿菌生長發(fā)育，細胞培養(yǎng)液表層展現(xiàn)一層薄菌膜，細胞培養(yǎng)液常呈淺綠色或深藍色。從細胞培養(yǎng)液的薄菌膜處挑取塑造物，畫線打疫苗十六烷三羥基溴化銨瓊脂平板電腦，置35℃±2℃塑造18-24小時，觀查菌體特點。綠膿桿菌在這里培養(yǎng)液上生長發(fā)育優(yōu)良，菌體平扁，邊沿不齊，菌體周邊培養(yǎng)液有點淡粉色，別的菌不久。,取異常菌體玻片作革蘭氏染色，鏡檢查為革蘭氏陽性菌陰性菌者應開展以下實驗。,抗霉素實驗：取一小塊清潔的乳白色過濾紙片放到殺菌平皿內(nèi)，用無菌檢測玻棒挑取異常菌體涂在過濾紙上面，隨后在其上滴入一滴新配置的1%二甲基對苯二胺標準溶液，30s內(nèi)發(fā)生淡粉色或暗紫色，為抗霉素實驗呈陽性，不掉色者為呈陰性。,綠膿菌素實驗：取2-3個異常菌體，各自打疫苗在綠膿菌素測量用培養(yǎng)液斜坡，35℃±2℃塑造24小時，添加三氯甲烷3-5mL，充足振蕩使塑造物中很有可能存有的綠膿菌素融解，待三氯甲烷呈深藍色時，用塑料吸管移到另一試管嬰兒中并添加1mol/L的硫酸1米L，振蕩后靜放一會兒。如頂層發(fā)生淡粉色或暗紫色即是呈陽性，表明有綠膿菌素存有。,（規(guī)范的附則）,商品除菌性能、抗菌性能與穩(wěn)定性測試方式,C1
試品收集,為使試品具備優(yōu)良的象征性，應當同一批號三個運送包裝中最少隨機抽取20件最少市場銷售包裝試品，在其中5件備用，5件做抗菌或除菌性能檢測，10件做穩(wěn)定性測試。,C2
實驗菌與菌液制取,C2.1
實驗菌,C2.1.1
病菌：橙黃色鏈球菌（ATCC 6538），大腸埃希菌（8099或ATCC 25922）。,C2.1.2
酵母：白色念珠菌（ATCC 10231）,菌液制?。喝【N第3-14代的營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液斜坡新鮮塑造物（18-24小時），用5mL 0.03mol/L聚磷酸鹽緩沖溶液（一下通稱PBS）洗下菌苔，使菌飄浮勻稱后用以上PBS稀釋液至所需濃度值。,C3
除菌性能實驗方式,該實驗抽樣位置，依據(jù)被試商品經(jīng)營者的表明而明確。,C3.1
還原劑評定實驗,開展除菌性能檢測務必根據(jù)下列還原劑評定實驗。,C3.1.1
實驗排序, 1
）染菌樣照 5mL PBS,2
）染菌樣照 5mL 還原劑,3
）染菌對相片 5mL 還原劑,4
）樣照 5mL 還原劑 染菌對相片,5
）染菌對照片 5mL PBS,6
）同批號PBS,7
）同批號中和劑,8
）同批號培養(yǎng)基,C3.1.2
點評要求,1
）第1組無實驗菌，或僅有極個別實驗菌菌體生長發(fā)育。,2
）第2組是較第1組為多，但較第3、4、5組為少的實驗菌體生長發(fā)育，并符合規(guī)定。,3
）第3、4、5組是類似量實驗菌生長發(fā)育，并在1*104-9*104cfu/片中間，其小組之間菌體數(shù)誤差應不超過15%。,4
）第6-8組無菌檢測生長發(fā)育。,5
）持續(xù)3次實驗獲得達標點評。,C3.2
除菌實驗,C3.2.1
操作流程,將實驗菌24小時斜坡塑造物用PBS洗下，做成菌懸液（規(guī)定的濃度值為：用100uL滴于對仍舊上面，收購 菌數(shù)為1*104-9*104cfu/片）。,取被試件片（2.0cm*3.0cm）和對仍舊片（與試件同質(zhì)性原材料，同樣尺寸，但沒有抗菌材料，且經(jīng)殺菌解決）各4片，分為4組放置4個殺菌平皿內(nèi)。,取以上菌懸液，各自在每一個被試件片和對仍舊上面滴入100uL，勻稱施膠，逐漸記時，功效2、5、10、20min，用無菌檢測鑷各自將樣照資金投入含5mL相對中和劑的試管嬰兒內(nèi)，充足攪拌，作適度稀釋液，隨后取在其中2-3個稀釋液度，各自汲取0.5mL，放置2個平皿，用涼至40-45℃的營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液（病菌）或沙氏瓊脂培養(yǎng)液（酵母菌）15mL作竭盡，旋轉(zhuǎn)平皿，使其充足勻稱，瓊脂凝結(jié)后旋轉(zhuǎn)平板電腦，35℃±2℃塑造48h（病菌）或72h（酵母菌），干活兒菌菌落計數(shù)。,實驗反復3次，按式（C1）測算除菌率：, X3 =
（A-B）/A *100% （C1),式中：X3――除菌率，%；, A
――對比試品均值菌體數(shù)；, B
――被使試品均值菌體數(shù)。,C3.2.2
點評規(guī)范,除菌率≥90%，商品有抑菌作用。,C4
總混性抗（抑）菌商品抗菌特性實驗方式,C4.1
操作流程,將實驗菌24小時斜坡塑造物用PBS洗下，做成菌懸液（規(guī)定的濃度值為：用100uL滴于對仍舊上面或5mL樣液內(nèi)，收購 菌數(shù)為1*104-9*104cfu/片或mL）。,取被試件片（2.0cm*3.0cm）或樣液（5mL）和對仍舊片或樣液（與試件同質(zhì)性原材料，同樣尺寸，但沒有抗菌材料，且經(jīng)殺菌解決）各4片（放置殺菌平皿內(nèi)）或4管。,取以上菌懸液，各自在每一個被試件片或樣液和對仍舊片或樣液上或內(nèi)滴加100uL，勻稱施膠/混和，逐漸記時，功效2、5、10、20min，用無菌檢測鑷各自將樣照或樣液（0.5mL）資金投入含5mL PBS的試管嬰兒內(nèi)，充足攪拌，作適度稀釋液，隨后取在其中2-3個稀釋液度，各自汲取0.5mL，放置2個平皿，用涼至40-45℃的營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液（病菌）或沙氏瓊脂培養(yǎng)液（酵母菌）15mL作竭盡，旋轉(zhuǎn)平皿，使其充足勻稱，瓊脂凝結(jié)后旋轉(zhuǎn)平板電腦，35℃±2℃塑造48h（病菌）或72h（酵母菌），干活兒菌菌落計數(shù)。,實驗反復3次，按式（C2）測算抗菌率 , X4 = ( A-B ) / A * 100
（C2),式中：X4――抗菌率，%；, A
――對比試品均值菌體數(shù)；, B
――被試試品均值菌體數(shù)。,C4.2
點評規(guī)范,抗菌率≥50%-90%，商品有殺菌作用，抗菌率≥90%，商品有較強殺菌作用。,C5
非溶出性抗（抑）菌商品抗菌特性實驗方式,C5.1
操作流程,稱量被試件片（裁成1.0cm*1.0cm尺寸）0.75g散裝包好。,將0.75g重樣照放進一個250ML的三角燒瓶中，各自添加70mL PBS和5mL菌懸液，使菌懸液在PBS中的濃度值為1*104-9*104cfu/ mL。,將三角燒瓶固定不動于震蕩搖床邊，以300r/min振搖1h。,取0.5mL振搖后的樣液，或用PBS做適度稀釋液后的樣液，以瓊脂竭盡法打疫苗平皿，開展菌落計數(shù)。,另外設對仍舊片組和不用樣照組，對仍舊片組的對仍舊片與被試件片一樣尺寸但沒有抑菌成份，別的操作流程均與被試件片組同樣，不用樣照組各自取5mL菌懸液和70mL PBS添加一個250ML三角燒瓶中，攪拌，各自于0時間和震蕩1h后，各取0.5mL菌懸液與PBS的混合液做適度稀釋液，隨后開展菌落計數(shù)。,實驗反復3次，按式（C3）測算抗菌率：, X5 =
（A ? B）/A * 100% (C3),式中： X5――抗菌率，%；, A
――被試試品震蕩前均值菌體數(shù)；, B
――被試試品震蕩后均值菌體數(shù)。,C5.2
點評規(guī)范,不用樣照組的菌體數(shù)在1*104-9*104cfu/ mL中間，且試品震蕩前后左右均值菌體數(shù)誤差在10%之內(nèi)，實驗合理；被試件片組抗菌率與對仍舊片組抗菌率的誤差＞26%，商品具備抑菌功效。,C6
穩(wěn)定性測試方式,C6.1
檢測標準,C6.1.1
當然備用：將原包裝試品置室內(nèi)溫度下最少1年，半年開展抗菌或除菌功能測試。,C6.1.2
加快實驗：將原包裝試品置54-57℃恒溫箱內(nèi)14天或37-40℃恒溫箱內(nèi)3個月，維持空氣濕度＞75%，開展抗菌或除菌功能測試。,C6.2
點評規(guī)范,商品經(jīng)當然備用，其除菌率或抗菌率做到附則C3或附則C4、附則C5中要求的指標值，商品的除菌或殺菌作用在室內(nèi)溫度下的維持時間即是當然備用時間。,商品經(jīng)54℃加快實驗，其除菌率或抗菌率做到附則C3或附則C4、附則C5中要求的指標值，商品的殺菌或抑菌作用在室溫下最少維持一年。,產(chǎn)品經(jīng)37℃加快實驗，其殺菌率或抗菌率做到附錄C3或附錄C4、附錄C5中要求的指標值，產(chǎn)品的殺菌或抑菌作用在室溫下最少維持二年。,
,式中：c――標準氣體濃度，ug/mL；, k
――稀釋倍數(shù)；, t
――室內(nèi)溫度，℃。,D4.2
試品解決,最少取2個最少包裝商品，將其剪下來，任意精準稱量3g，放進提純器皿中，添加5mL雙蒸水，充足混勻，置放4h或震蕩30min備用。如被檢試品為吸水樹脂原材料商品，科適度提升雙蒸水量，以保證 最少可吸出1mL樣液。,D4.3
剖析,待儀器設備平穩(wěn)后，在一樣標準下，環(huán)氧乙烷標準氣體各氣相1.0ML，待剖析試品（溶液）各氣相2uL，每一樣液平行面作2次測量。,依據(jù)保存期判定，依據(jù)峰總面積（或基線噪聲）開展定量分析測算，取均值。,D4.4
測算,以所進環(huán)氧乙烷標準氣的mg（ug）數(shù)對個人所得峰總面積（或基線噪聲）作環(huán)氧乙烷工作中曲線圖。,以試品中環(huán)氧乙烷相匹配的峰總面積（或基線噪聲）在工作中曲線圖上求取環(huán)氧乙烷的量A（ug），并且以式（D2）求取商品中環(huán)氧乙烷的含量。, 
,式中：X――商品環(huán)氧乙烷含量，ug/g；, A
――從工作中曲線圖中常查出來環(huán)氧乙烷量，ug；, M
――所取試品量，g；,V
（萃）
――提取液容積，mL；,V
（進）
――進樣量，mL。, ,（規(guī)范的附則）,工作環(huán)境取樣與測試標準,E1
氣體取樣與測試標準,E1.1
試品收集,在動態(tài)性下開展。,房間內(nèi)總面積不超過30m2，在直線里設里、中、外三點，里、外點部位離墻1米；房間內(nèi)總面積超出30m2，設東、西、南、北、中5點，周邊4點距墻1米。,取樣時，將含營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液的平板電腦（直徑9cm）置取樣點（約桌面上高寬比），開啟平皿蓋，使平板電腦在空氣中曝露5min。,E1.2
尿培養(yǎng),在取樣前將準備好的營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液置35℃±2℃塑造24小時，取下查驗有零污染，將環(huán)境污染培養(yǎng)液去除。,將已收集的培養(yǎng)液在6小時內(nèi)送試驗室，于35℃±2℃塑造48h觀查結(jié)果，記數(shù)平板電腦上細菌菌落數(shù)。,E1.3
菌體測算, 
,
式中：y1――空氣中細菌菌落數(shù)量，cfu/m3；, A
――平板電腦上均值細菌菌落數(shù)；, S1
――平板電腦總面積，cm2；, t
――曝露時間，min。,E2
操作臺表層與職工手表層取樣與測試標準,E2.1
試品收集,操作臺：將經(jīng)滅菌的內(nèi)徑為5厘米*5厘米的滅菌規(guī)格型號板放到被檢物件表面，用一浸有滅菌生理鹽水的棉簽在其中擦抹10次，隨后剪去手觸碰一部分棉簽，將棉簽放進含十米L滅菌生理鹽水的取樣管中復檢。,E2.2
細菌菌落數(shù)量檢驗,將已收集的試品在6小時內(nèi)送試驗室，每一個取樣管充足攪拌后取1米L樣液，放進滅菌平皿內(nèi)，竭盡營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液，每一個試品平行面打疫苗二塊平皿，置35℃±2℃塑造48h觀查結(jié)果，記數(shù)平板電腦上細菌菌落數(shù)。, 
,式中：y2――操作臺表面細菌菌落數(shù)量，cfu/cm2；, A
――平板電腦上均值細菌菌落數(shù)；, S2
――取樣總面積，cm2；, y3
――職工手表面細菌菌落數(shù)量，cfu/支手。,E2.3
病原菌檢驗,按本規(guī)范附則B開展。, ,（規(guī)范的附則）,消毒殺菌實際效果微生物檢測評價方法,F1
環(huán)氧乙烷消毒殺菌,F1.1
環(huán)氧乙烷消毒殺菌實際效果點評用微生物指示菌為枯草桿菌灰黑色變異芽胞（ATCC 9372）。在菌量為5*105-5*106cfu/片、環(huán)氧乙烷濃度值為600Mg/L±30mg/L、功效溫度為54℃±2℃、空氣濕度為60%±10%標準下，其消滅90%微生物所需時間D值應是2.5-5.8米in，生存時間≥7.5min，殺滅時間≤58min。,F1.2
每一次檢測最少布線10片生物指示劑，放于較難消滅處。消毒殺菌結(jié)束，取下指示菌片打疫苗鷹眼俠骨頭湯細胞培養(yǎng)液作判定檢驗或打疫苗營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液作定量分析檢驗，將沒有處理陽性對照菌片作同樣打疫苗，二者均置35℃±2℃塑造。陽性對照應在24小時內(nèi)有菌生長發(fā)育。判定塑造試品如持續(xù)觀查7天所有無菌檢測生長發(fā)育，可匯報生物指示劑塑造呈陰性，消毒殺菌達標。定量分析塑造試品與陽性對照對比消滅指數(shù)值做到103也可匯報消毒殺菌達標。,F2
電磁波輻射消毒殺菌,F2.1
電磁波輻射消毒殺菌實際效果點評 用微生物指示菌為簡短鏈球菌芽胞E601（ATCC 27142），在菌量為5*105-5*106cfu/口腔上皮細胞，其消滅90%微生物所需使用量D10值應是1.5kGy。,F2.2
每一次檢測最少選5箱，每件商品布線3片生物指示劑，置最少使用量處。消毒殺菌結(jié)束，取下指示菌片打疫苗營養(yǎng)成分骨頭湯細胞培養(yǎng)液作判定檢驗或打疫苗營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液作定量分析檢驗，將沒有處理陽性對照菌片作同樣打疫苗，二者均置35℃±2℃塑造。陽性對照應在24小時內(nèi)有菌生長發(fā)育。判定塑造試品如持續(xù)觀查7天所有無菌檢測生長發(fā)育，可匯報生物指示劑塑造呈陰性，消毒殺菌達標。定量分析塑造試品與陽性對照對比消滅指數(shù)值做到103也可匯報消毒殺菌達標。,F3
工作壓力蒸汽消毒,參考GB15981-1995的要求實行。, ,附則G,（規(guī)范的附則）,培養(yǎng)液與具體制取,G1
營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液,成份：,
蛋白胨 20g,
牛肉膏 4g,
氧化鈉 5G,
瓊脂 15g-40g,
純凈水 100mL,制作方法：除瓊脂外別的成份融解于純凈水中，調(diào)pH至7.2-7.4，添加瓊脂，加溫融解，散裝試管嬰兒，121℃殺菌15min儲備用。,G2
乳清蛋白膽鹽發(fā)醇管,成份：,
蛋白胨 40g,
豬膽鹽（或牛、羊膽鹽） 5G,
乳清蛋白 20g, 0.04%
溴甲酚紫溶液 25mL,
純凈水 加至100mL,制作方法：將蛋白胨、膽鹽及乳清蛋白溶解水里，校準pH至7.4，添加顯色劑，散裝沒管五十米L，并放進一個小倒管，115℃殺菌15min，即得。,G3
乳清蛋白發(fā)醇管,成份：,
蛋白胨 40g,
乳清蛋白 20g, 0.04%
溴甲酚紫溶液 25mL,
純凈水 加至100mL,制作方法：將蛋白胨及乳清蛋白溶解水里，校準pH至7.4，添加顯色劑，散裝每管十米L，并放進一個小倒管，115℃殺菌15min，即得。,G4
伊紅美藍瓊脂（EMB）,成份：,
蛋白胨 20g,
乳清蛋白 20g,
磷酸氫二鉀 3g,
瓊脂 17g, 2%
伊紅Y水溶液 50mL,0.65%
美藍水溶液 十米L,
純凈水 加至100mL,制作方法：將蛋白胨、聚磷酸鹽和瓊脂融解于純凈水中，校準pH至7.1，散裝與蒸發(fā)皿內(nèi)，121℃殺菌15min預留，臨用時添加乳清蛋白并加溫融化瓊脂，冷至55℃，添加伊紅和美藍水溶液混勻，竭盡平板電腦。,G5 SCDLP
液體培養(yǎng)基,成分：,
opo結(jié)構(gòu)脂胨 17 g,
黃豆蛋白胨 3 g,
氧化鈉 5 g,
磷酸氫二鉀 2.5 g,
葡萄糖水 2.5 g,大豆卵磷脂 1 g,
吐溫80 7 g ,
純凈水 1000 mL,制作方法：將各種各樣成分混和(如無opo結(jié)構(gòu)脂胨和黃豆蛋白胨能用日本多胨替代)，加溫融解，調(diào)pH至7.2～7.3，散裝，121℃殺菌20min，混勻，防止吐溫80沉到底端，冷至25℃后應用。,G6
十六烷三羥基溴化銨培養(yǎng)液,成分：,牛肉膏 3 g,
蛋白胨 10 g,
氧化鈉 5 g,
十六烷三羥基溴銨 0.3 g,
瓊脂 20 g,
純凈水 1000 mL,制作方法：除瓊脂外，以上各成份混和加溫融解，調(diào)pH至7.4～7.6，隨后添加瓊脂，115℃殺菌20 min，冷至55℃上下竭盡平皿。,G7
綠膿菌素測量用培養(yǎng)液斜坡,成份：,
蛋白胨 20 g,
氧化鎂 1.4 g,
硫酸銨 10 g,
瓊脂 18 g,
凡士林(化學純) 20g,
純凈水 加至1 000 mL,制作方法：將蛋白胨、氧化鎂和硫酸銨加到純凈水中，加溫融解，調(diào)pH至7.4，添加瓊脂和凡士林，加溫融解，散裝試管嬰兒，115℃殺菌20 min，做成斜坡預留。G8 果膠培養(yǎng)液,成分：,
牛肉膏 3 g,
蛋白胨 5 g,
果膠 120 g,
純凈水 1 000 mL,制作方法：各成分添加純凈水中泡浸20 min，加溫拌和融解，調(diào)pH至7.4，5 mL散裝試管嬰兒中，115℃ 殺菌20 min，站立做成高層住宅預留。,G9
磷酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)液,成分：,
蛋白胨 10 g,
酵母浸膏 3 g,
硝酸鉀 2 g,
亞硝酸鈉 0.5 g,
純凈水 1000 mL,制作方法：將蛋白胨與酵母浸膏加到純凈水中，加溫融解，調(diào)pH至7.2，燒開過慮后補充水率，添加硝酸鉀和亞硝酸鈉融解勻稱，散裝到有小倒管的試管嬰兒中，115℃殺菌20 min預留。,G10
血瓊脂培養(yǎng)液,成分：,營養(yǎng)瓊脂 100 mL,
脫化學纖維羊血(或兔血) 10 mL,制作方法：將殺菌后的營養(yǎng)瓊脂加溫融化，涼至55℃上下，用無菌檢測方式將10 mL脫化學纖維血添加后混勻，竭盡平皿置電冰箱預留。,G11
甘露醇發(fā)醇培養(yǎng)液,成分：,
蛋白胨 10 g,
牛肉膏 5 g,
氧化鈉 5 g,
甘露醇 10 g, 0.2
％溴麝香草酚藍水溶液 12 mL,純凈水 1000 mL,
制作方法：將蛋白胨、氧化鈉、牛肉膏加到純凈水中，加溫融解，調(diào)pH至7.4，添加甘露醇和溴麝香草酚藍攪拌后，散裝試管嬰兒，115℃殺菌20 min預留。,G12
葡萄糖水骨頭湯,成分：, 蛋白胨 10 g,
牛肉膏 5 g,
氯化鈉 5 g,
葡萄糖水 10 g,純凈水 1000 mL,制作方法：以上成份溶解純凈水中，調(diào)pH至7.2～7.4，加溫融解，散裝試管嬰兒，121℃殺菌15min儲備用。,G13
兔血液,制作方法：取殺菌3.8％三聚磷酸鈉1份，兔全血4份，攪拌靜放，3 000 r/min抽濾5 min，取上清，棄血球。,G14
沙氏瓊脂培養(yǎng)液,
蛋白胨 10 g,
葡萄糖水 40g,
瓊脂 40g,純凈水 1000 mL,用700 mL純凈水將瓊脂融解，300 mL純凈水將葡萄糖水與蛋白胨融解，混和以上兩一部分，混勻后散裝，115℃殺菌15 min，即得。應用前，用過慮殺菌方式添加0.1g/L的氯霉素或是0.03g/L的氨芐青霉素。,判定實驗選用沙氏細胞培養(yǎng)液，即除不用瓊脂外別的成份與制作方法跟上面一樣。,G15
營養(yǎng)成分骨頭湯細胞培養(yǎng)液,
蛋白胨 10 g,
氧化鈉 5 g,
牛肉膏 3 g,純凈水 1000 mL,調(diào)整pH使殺菌后為7.2～7.4，散裝，115℃殺菌30 min，即得。,G16
溴甲酚紫葡萄糖水蛋白胨水培養(yǎng)液,
蛋白胨 10 g,
葡萄糖水 5G,純凈水 1000 mL,調(diào)整pH至7.0～7.2，加2％溴甲酚紫酒精溶液0.6 mL，115℃ 殺菌30 min，即得。,G17
革蘭氏染色液,結(jié)晶紫上色液：,結(jié)晶紫 1 g, 95
％酒精 20 mL, 1
％草酸銨溶液 80 mL ,將結(jié)晶紫融解于酒精中，隨后與草酸銨水溶液混和。,革蘭氏碘液：,結(jié)晶紫 1 g,碘 1 g,
碘化鉀 2 g,
純凈水 300 mL,脫色劑,95
％酒精,復染色液：,(1)
沙黃復染色液：,沙黃 0.25 g, 95
％酒精 10 mL,純凈水 90 mL,將沙黃融解于酒精中，隨后用純凈水稀釋液。,(2)
稀石炭酸復紅液,稱量偏堿復紅20g，研細，加95％酒精100mL，置放留宿，過濾紙過慮。取該液十米L，加5％石炭酸溶液90mL混和，即是石炭酸復紅液。再取此液十米L，放水90mL，即是稀石炭酸復紅液。,G18 0.03 mol/L
聚磷酸鹽緩沖溶液（PBS，pH7.2）,成份：,磷酸氫二鈉 2.83 g,
磷酸二氫鉀 1.36 g,
純凈水 1000 mL,一次性使用日用品質(zhì)量標準 GB15979-2002
前 言
本規(guī)范全篇強制性
GB15979-1995《一次性使用衛(wèi)生 用品衛(wèi)生標準》自1996年公布至今，使制造業(yè)企業(yè)確立了衛(wèi)生要求和總體目標，管理方法單位 也擁有監(jiān)管檢驗根據(jù)，對促進該領(lǐng)域的身心健康發(fā)展趨勢與環(huán)境衛(wèi)生水準的提升 具有了積極主動功效。此外，伴隨著產(chǎn)品品種與原材料的發(fā)展趨勢，該規(guī)范有一些地區(qū)必須健全。因而明確提出修訂本規(guī)范。
本規(guī)范自執(zhí)行之日起替代GB1579-1995.
本規(guī)范的附則A至附則G為規(guī)范的附則。
本規(guī)范由我國國家衛(wèi)生部明確提出。
本規(guī)范承擔擬定企業(yè)：上海疾病防治監(jiān)測中心；參與擬定企業(yè)：寶潔（我國）有限責任公司、強生公司（我國）有限責任公司。
本規(guī)范關(guān)鍵起草人：沈偉、盧敏、楊宏平、縝密、潘希和、劉育京。
我國國家行業(yè)標準
一次性使用日用品質(zhì)量標準 GB15979-2002
Hygienic standard for disposable sanitary products 替代GB15979-1995
本標準了一次性使用日用品的商品和工作環(huán)境質(zhì)量標準、消毒殺菌實際效果微生物檢測點評規(guī)范和相對檢測方式，及其原料與商品生產(chǎn)制造、消毒殺菌、存儲、運送全過程衛(wèi)生要求和商品標志規(guī)定。
在本規(guī)范中，一次性使用日用品就是指：
本規(guī)范應用與中國從業(yè)一次性使用衛(wèi)生用品的生產(chǎn)制造與市場銷售的單位、企業(yè)或本人，也適用經(jīng)銷商進口一次性使用衛(wèi)生用品的單位、企業(yè)或本人。
以下標準所包括的條文，根據(jù)在本標準中引入而組成為本標準的條文。本標準出版發(fā)行時，所顯示版本均為合理。全部標準都是會被修定，應用本標準的個方應討論應用以下標準全新版本的概率。
GB 15981-1995 消毒與滅菌實際效果的評價方法與標準
本標準選用以下界定。
一次性使用衛(wèi)生用品
應用一次后即丟掉的、與身體立即或間接接觸的、并為做到人體系統(tǒng)環(huán)境衛(wèi)生或衛(wèi)生防疫（抑菌或抗菌）目地而應用的各種各樣日常日常生活用品，商品特性能夠是固態(tài)還可以使液態(tài)。比如，一次性使用膠手套或護指（包含衛(wèi)生護墊）、尿不濕等糞便衛(wèi)生用品（不包括平穩(wěn)紙巾等洗手間拿紙）、安全套等，在本標準中統(tǒng)稱之為“衛(wèi)生用品”。
4.1 外型務必干凈整潔，合乎該衛(wèi)生用品原有特性，不可有出現(xiàn)異常味道與臟東西。
4.2 不可對肌膚與黏膜造成欠佳刺激性與人民反映以及他危害功效。
4.3 商品須合乎表1中分子生物學指標值。
表1
| 產(chǎn)品品種 |
微生物菌種指標值 |
||||
| 原始環(huán)境污染菌1) cfu/g |
細菌菌落數(shù)量cfu/g或cfu/mL |
大腸桿菌 |
高致病潰爛菌2） |
細菌菌落總數(shù)cfu/g或cfu/mL |
|
| 手套或指套、衛(wèi)生紙、濕巾紙、內(nèi)褲、電話膜 抑菌（或抗菌）液態(tài)商品 衛(wèi)生濕巾 防護口罩 普通 消毒殺菌級 女性生理期日用品 普通 消毒殺菌級 尿不濕等糞便日用品 普通 消毒殺菌級 安全套 |
≤10000
≤10000
≤10000 |
≤200 ≤200 ≤20
≤200 ≤20
≤200 ≤20
≤200 ≤20 ≤20 |
不可驗出 不可驗出 不可驗出
不可驗出 不可驗出
不可驗出 不可驗出
不可驗出 不可驗出 不可驗出 |
不可驗出 不可驗出 不可驗出
不可驗出 不可驗出
不可驗出 不可驗出
不可驗出 不可驗出 不可驗出 |
≤100 ≤100 不可檢出
≤100 不可檢出
≤100 不可檢出
≤100 不可檢出 不可檢出 |
| 1）如初見環(huán)境污染菌超出表內(nèi)標值，應相對提升 消滅指數(shù)值使做到本標準的病菌與細菌限制值。 2）高致病潰爛菌指綠膿桿菌、橙黃色鏈球菌與血溶鏈球菌感染。 |
|||||
4.4 衛(wèi)生濕巾除務必做到表1中的分子生物學規(guī)范外，對大腸埃希菌和橙黃色鏈球菌的消滅率須≥90%，如需標出對細菌的功效，還須對白色念珠菌的消滅率≥90%，其抑菌作用在室內(nèi)溫度下最少須維持1年。
4.5 抑菌（或抗菌）商品出務必做到表1中的類似平級商品分子生物學規(guī)范外，對大腸埃希菌和橙黃色鏈球菌的抗菌率須≥50%（總混性）或＞26%（非溶出性），如需標出對細菌的功效， 還須白色念珠菌的抗菌率≥50%（總混性）或＞26%（非溶出性），其殺菌作用在室內(nèi)溫度下最少須維持1年。
4.6 一切經(jīng)環(huán)氧乙烷消毒殺菌的日用品原廠時，環(huán)氧乙烷含量務必≤250ug/g。
5.1 安裝與包裝生產(chǎn)車間空氣中細菌菌落數(shù)量應≤2500cfu/m3.
5.2 操作臺表層細菌菌落數(shù)量應≤20cfu/cm2.
5.3 職工手表層細菌菌落數(shù)量應≤300cfu/支手，并不可檢出病原菌。
6.1 環(huán)氧乙烷消毒：對枯草桿菌灰黑色變異芽胞（ATCC 9372）的消滅指數(shù)值≥103.
6.2 電磁波輻射消毒：對簡短鏈球菌芽胞E6d（ATCC 27142）的消滅指數(shù)值應≥103.
6.3 工作壓力蒸氣消毒：對嗜熱人體脂肪鏈球菌（ATCC 7953）的消滅指數(shù)值應≥103.
7.1 商品測試標準
7.1.1 商品外型：估測，應合乎本規(guī)范3.1的要求。
7.1.2 商品毒理測試標準：見附則A。
7.1.3 商品微生物檢驗方式：見附則B。
7.1.4 商品除菌特性、抗菌特性與穩(wěn)定性測試方式：見附則C。
7.1.5 商品環(huán)氧乙烷含量測試標準：見附則D。
7.2 工作環(huán)境取樣與測試標準：見附則E。
7.3 消毒實際效果生物監(jiān)測評價方式：見附則F。
8.1 原料應無毒性、沒害、零污染；原料包裝應清理，清晰說明含有物的名字、生產(chǎn)制造企業(yè)、生產(chǎn)制造日期或生產(chǎn)日期；危害環(huán)境衛(wèi)生醫(yī)治的與原料應不外露；有特別要求的原料應標出儲存標準和保存期。
8.2 對危害商品環(huán)境衛(wèi)生品質(zhì)的原料應該有相對檢測報告或證明文件，必需時要開展微生物監(jiān)管和采取有效對策。
8.3 嚴禁應用廢料的日用品作原料或半成品加工。
9.1 廠區(qū)周邊環(huán)境應干凈整潔，無廢棄物，無蚊、蠅等蟲害蚊蠅滋生。
9.2 廠區(qū)應該有充足室內(nèi)空間達到生產(chǎn)制造必須，合理布局務必合乎生產(chǎn)工藝流程規(guī)定，切分有效，人、物分離，商品步驟中無反向與交叉式。原材料進到與制成品出來應該有污染治理對策和嚴苛的安全操作規(guī)程，降低生產(chǎn)環(huán)境微生物菌種環(huán)境污染。
9.3 生產(chǎn)制造區(qū)域內(nèi)應配備合理的防污、防蛀、防鼠措施，路面、墻壁、工作中櫥柜臺面應整平、光潔、不起塵、便于除灰與清理消毒殺菌，有充裕的照明燈具與室內(nèi)消毒或凈化處理對策，以確保生產(chǎn)環(huán)境達到本規(guī)范第5章的要求。
9.4 配備必不可少的生產(chǎn)制造和質(zhì)量檢驗機器設備，有詳細的生產(chǎn)制造和質(zhì)量檢驗紀錄，進一步確保商品環(huán)境衛(wèi)生品質(zhì)。
9.5 生產(chǎn)制造過程中應用易燃性、易燃易爆物件或造成有害物的，必不可少具有相對安全性防護措施，合乎相關(guān)法律法規(guī) 規(guī)范或要求。
9.6 原料和制成品應分離堆積，待檢、達標、不過關(guān)原料和制成品應嚴苛分離堆積并設顯著標示。庫房內(nèi)要干躁、清理、自然通風，設防蛀、防蠅設備和墊倉板，合乎商品儲存標準。
9.7 進到廠區(qū)要跳槽衣和勞保鞋，戴工帽，直接接觸裸裝商品的工作人員需佩戴口罩，清理和消毒殺菌兩手或戴手套；廠區(qū)前要相對設立更衣間、洗手臺、消毒池與緩沖區(qū)域。
9.8 從業(yè)日用品生產(chǎn)制造的工作人員應維持清潔衛(wèi)生，不可留手指甲，工作中時不可戴飾品，長頭發(fā)應卷在工帽內(nèi)。急性腸炎、傷寒論、慢性乙型肝炎、活躍性結(jié)核病、生殖皰疹、非淋及生膿性或滲出性皮膚疾病病人或醫(yī)院病毒攜帶者不可參加立即與商品觸碰的生產(chǎn)制造主題活動。
9.9 從業(yè)日用品生產(chǎn)制造的工作人員應在入崗前及按時（每一年一次）開展健康體檢與衛(wèi)生保健知識（包含生產(chǎn)制造環(huán)境衛(wèi)生、清潔衛(wèi)生、相關(guān)規(guī)范與標準）學習培訓，錄取者即可入崗。
10.1 消毒殺菌級商品最后消毒殺菌務必選用環(huán)氧乙烷、電磁波輻射或工作壓力蒸氣等合理消毒方法。常用消毒機務必合乎相關(guān)質(zhì)量標準。
10.2 依據(jù)商品質(zhì)量標準、 原始環(huán)境污染菌與消毒殺菌實際效果微生物檢測點評規(guī)范制訂消毒殺菌程序流程、性能參數(shù)、工作規(guī)范，工作經(jīng)驗證后嚴苛依照明確的消毒殺菌加工工藝實際操作。該消毒殺菌程序流程、性能參數(shù)或危害消毒殺菌實際效果的原料或生產(chǎn)工藝流程產(chǎn)生變化后應再次認證明確消毒殺菌加工工藝。
10.3 每一次消毒殺菌過程務必開展相對的加工工藝（物理學）和有機化學顯色劑檢測，每月用相對的生物指示劑檢測，僅有當加工工藝檢測、有機化學檢測、微生物檢測做到要求規(guī)定時，被消毒殺菌物件才可以原廠。
10.4 商品經(jīng)消毒殺菌解決后，外型與特性應與消毒殺菌解決前無顯著由此可見的差別。
11.1 實行日用品運送或存儲的企業(yè)或本人，應嚴苛依照經(jīng)營者出示的運送與存儲規(guī)定開展運送或存儲。
11.2 立即與商品觸碰的包裝制品務必無毒性、沒害、清理，商品的全部包裝制品務必具備充足的密閉性和堅固性以做到確保商品在一切正常的運送與存儲標準下不會受到環(huán)境污染的目地。
12.1 商品標志應合乎《中華人民共和國產(chǎn)品質(zhì)量法》的要求，并在包裝設計上標出實行的質(zhì)量標準號及其生產(chǎn)制造日期和保存期（有效期限）或生產(chǎn)日期和限制應用日期。
12.2 消毒級商品還應在市場銷售包裝上標明“消毒級”字樣及其消毒日期和有效期或消毒批號和限定應用日期，在運送包裝上標出“消毒級”字樣及其消毒企業(yè)與詳細地址、消毒方式、消毒日期和有效期或消毒批號和限定應用日期。
（規(guī)范的附則）
商品毒理測試標準
A1 各種商品毒理檢測指標值
當原料、生產(chǎn)工藝流程等產(chǎn)生變化很有可能危害商品毒副作用時，應按表A1依據(jù)不一樣產(chǎn)品品種出示合理的（經(jīng)政府部門評定的第三方）制成品毒結(jié)構(gòu)力學檢測報告。
表A1
| 產(chǎn)品品種 |
肌膚刺激性實驗 |
陰道粘膜刺激性實驗 |
肌膚超敏反應實驗 |
| 膠手套或護指、內(nèi)褲 |
√ |
|
√ |
| 抑菌（或抗菌）液態(tài)商品 |
√ |
依據(jù)主要用途挑選1） |
√ |
| 濕巾紙、衛(wèi)生濕巾 |
√ |
依據(jù)主要用途挑選1） |
依據(jù)原材料挑選 |
| 口罩 |
√ |
|
|
| 女性生理期日用品 |
|
√ |
√ |
| 尿不濕等糞便日用品 |
√ |
|
√ |
| 安全套 |
|
√ |
√ |
| 1）用以正確引導黏膜的商品須做正確引導黏膜刺激性實驗，但不必做肌膚刺激性實驗。 |
|||
A2 實驗方式
肌膚刺激性實驗、正確引導黏膜刺激性實驗和肌膚超敏反應實驗方式按國家衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》（第三版）第一手冊《實驗技術(shù)規(guī)范》（1999）中的“消毒液毒理試驗技術(shù)性”中相對的實驗方式開展。
固態(tài)商品的試品制取方式依照A3開展。
注
1、用以肌膚刺激性實驗中的空白試驗應是：鹽水和斑紙貼。
2、在肌膚超敏反應中，致敏解決和激起解決常用的使用量保持一致。
A3 試品制取
A3.1 肌膚刺激性實驗和肌膚超敏反應實驗
以橫斷方法剪一塊斑貼尺寸的產(chǎn)品。針對干的產(chǎn)品，如尿不濕、女性生理期日用品，用鹽水潤濕后貼到肌膚上，再用斑貼紙遮蓋。
A3.2 正確引導黏膜刺激性實驗
A3.2.1 干的產(chǎn)品（如女性生理期日用品）
以橫斷方法裁取充足量的產(chǎn)品，按1g/十米L的占比添加殺菌鹽水，密封性于提純器皿中拌和后放置37℃±1℃下置放24小時。制冷到室內(nèi)溫度，拌和后析抽樣液備檢。
A3.2.2 濕的產(chǎn)品（如衛(wèi)生濕巾）
在開展陰道粘膜刺激性實驗的當日，擠壓濕巾紙里的加上液做為試件。
A4 判斷規(guī)范
以國家衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》（第三版）第一手冊《試驗技術(shù)規(guī)范》（1999）中“毒理實驗結(jié)果的最后判斷”的相對一部分做為實驗結(jié)果判斷標準。
（規(guī)范的附則）
產(chǎn)品微生物檢驗方式
B1 產(chǎn)品收集與試品解決
交于一批號的三個運送包裝中最少提取12個最少市場銷售包裝試品，1/4試品用以檢驗，1/4試品用以備用，另1/2試品（可就地保存）必需時用以復查。取樣的最少市場銷售包裝不應該有裂開，檢測前不可啟開。
在100級凈化處理標準下要無菌檢測方式開啟用以檢驗的最少3個包裝，從每一個包裝中抽樣，精確稱量20g±1g試品。剪下來后添加到200mL殺菌鹽水中，充足攪拌，獲得一個鹽水樣液。液態(tài)產(chǎn)品用源液立即做樣液。
如被檢試品帶有很多吸水樹脂原材料而造成 不可以吸出充足樣液時，封閉液量可按每一次五十米L增長，直到能吸出充足檢測用樣液。在預估細菌菌落數(shù)量與細菌菌落總數(shù)時相對調(diào)節(jié)稀釋液度。
B2 細菌菌落數(shù)量與原始環(huán)境污染菌檢驗方式
本方式適用產(chǎn)品原始環(huán)境污染菌與細菌菌落數(shù)量（下列通稱為細菌菌落數(shù)量）檢驗。
B2.1 操作流程
待以上鹽水 樣液當然地基沉降后取上清液做菌落計數(shù)。共打疫苗5個平皿，每一個平皿中添加1米L樣液，隨后用制冷至45℃上下的溶化的營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)基15-50mL倒入每一個平皿內(nèi)混和勻稱。待瓊脂凝結(jié)后旋轉(zhuǎn)平皿置35℃±2℃塑造48h后，測算平板電腦上的菌落數(shù)。
B2.2 結(jié)果匯報
菌落呈塊狀生長發(fā)育的平板電腦不適合選用；記數(shù)符合規(guī)定的平板電腦上的菌落，按式（B1）數(shù)值：
式中：X1――病菌菌落數(shù)量，cfu/g或cfu/mL；
A――5塊瓊脂培養(yǎng)基版本上的病菌菌落數(shù)量；
K――稀釋液度。
當菌落數(shù)在100之內(nèi)，按實了解匯報，超過100時才有二位有效數(shù)字。
假如試品菌落數(shù)量超出本規(guī)范的要求，按B2.3開展復查和結(jié)果匯報。
B2.3 復查方式
將存留的復查試品依前法進行復測2次，2次結(jié)果均值都做到本規(guī)范的要求，則判斷被檢試品達標；在其中有一切1次結(jié)果均值超出本標準，則判斷被檢試品不過關(guān)。
B3 大腸桿菌檢驗方式
B3.1 操作流程
抽樣液5mL，打疫苗五十米L乳清蛋白膽鹽發(fā)醇管，置35℃±2℃塑造24小時，如不產(chǎn)酸都不脹氣，則匯報為大腸桿菌呈陰性。
如產(chǎn)酸脹氣，則畫線打疫苗伊紅美藍瓊脂平板電腦，置35℃±2℃塑造18-24小時，觀查平板電腦上菌落形狀。典型性的腸子菌落為紫黑色或紅紫色，環(huán)形，邊沿齊整，表層光潔潮濕，常具備金屬質(zhì)感，也是有的呈紫黑，沒有或有點金屬質(zhì)感，或淡粉色，管理中心較深的菌落。
取疑是菌落1-2個作革蘭氏染色鏡檢查，另外打疫苗乳清蛋白發(fā)醇管，置35℃±2℃塑造24小時，觀察產(chǎn)氣情況。
B3.2 結(jié)果匯報
凡乳清蛋白膽鹽發(fā)醇管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，乳清蛋白發(fā)醇管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，在伊紅美藍平板電腦上面有典型性沙門氏菌落，革蘭氏染色為呈陰性無枯草芽孢菌，可匯報被檢試品驗出大腸埃希菌。
B4 綠膿桿菌檢驗方式
B4.1 操作流程
抽樣液5mL，添加到五十米L SCDLP細胞培養(yǎng)液中，充足攪拌，置35℃±2℃塑造18-24小時。若有綠膿桿菌生長發(fā)育，細胞培養(yǎng)液表層展現(xiàn)一層薄菌膜，細胞培養(yǎng)液常呈淺綠色或深藍色。從細胞培養(yǎng)液的薄菌膜處挑取塑造物，畫線打疫苗十六烷三羥基溴化銨瓊脂平板電腦，置35℃±2℃塑造18-24小時，觀察菌體特點。綠膿桿菌在這里培養(yǎng)液上生長發(fā)育優(yōu)良，菌體平扁，邊沿不齊，菌體周邊培養(yǎng)液有點淡粉色，別的菌不久。
取異常菌體玻片作革蘭氏染色，鏡檢查為革蘭氏陽性菌陰性菌者應開展以下實驗。
抗霉素實驗：取一小塊清潔的乳白色過濾紙片放到殺菌平皿內(nèi)，用無菌檢測玻棒挑取異常菌體涂在過濾紙上面，隨后在其上滴入一滴新配置的1%二甲基對苯二胺標準溶液，30s內(nèi)發(fā)生淡粉色或暗紫色，為抗霉素實驗呈陽性，不掉色者為呈陰性。
綠膿菌素實驗：取2-3個異常菌體，各自打疫苗在綠膿菌素測量用培養(yǎng)液斜坡，35℃±2℃塑造24小時，添加三氯甲烷3-5mL，充足震蕩使塑造物中很有可能存有的綠膿菌素融解，待三氯甲烷呈深藍色時，用塑料吸管移到另一試管嬰兒中并添加1mol/L的硫酸1米L，震蕩后靜放一會兒。如頂層發(fā)生淡粉色或暗紫色即是呈陽性，表明有綠膿菌素存有。
（規(guī)范的附則）
商品除菌特性、抗菌特性與穩(wěn)定性測試方式
C1 試品收集
為使試品具備優(yōu)良的象征性，應當同一批號三個運送包裝中最少隨機抽取20件最少市場銷售包裝試品，在其中5件備用，5件做抗菌或除菌功能測試，10件做穩(wěn)定性測試。
C2 實驗菌與菌液制取
C2.1 實驗菌
C2.1.1 病菌：橙黃色鏈球菌（ATCC 6538），大腸埃希菌（8099或ATCC 25922）。
C2.1.2 酵母：白色念珠菌（ATCC 10231）
菌液制?。喝【N第3-14代的營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液斜坡新鮮塑造物（18-24小時），用5mL 0.03mol/L聚磷酸鹽緩沖溶液（一下通稱PBS）洗下菌苔，使菌飄浮勻稱后用以上PBS稀釋液至所需濃度值。
C3 除菌特性實驗方式
該實驗抽樣位置，依據(jù)被試商品經(jīng)營者的表明而明確。
C3.1 還原劑評定實驗
開展除菌功能測試務必根據(jù)下列還原劑評定實驗。
C3.1.1 實驗排序
1）染菌樣照 5mL PBS
2）染菌樣照 5mL 還原劑
3）染菌對相片 5mL 還原劑
4）樣照 5mL 還原劑 染菌對相片
5）染菌對相片 5mL PBS
6）同批號PBS
7）同批號還原劑
8）同批號培養(yǎng)液
C3.1.2 點評要求
1）第1組無實驗菌，或僅有極個別實驗菌菌體生長發(fā)育。
2）第2組是較第1組為多，但較第3、4、5組為少的實驗菌體生長發(fā)育，并符合規(guī)定。
3）第3、4、5組是類似量試驗菌生長，并在1*104-9*104cfu/片中間，其小組之間菌體數(shù)誤差應不超過15%。
4）第6-8組無菌檢測生長。
5）持續(xù)3次試驗獲得合格點評。
C3.2 除菌試驗
C3.2.1 操作流程
將試驗菌24小時斜坡塑造物用PBS洗下，做成菌懸液（規(guī)定的濃度值為：用100uL滴于對仍舊上面，收購 菌數(shù)為1*104-9*104cfu/片）。
取被試件片（2.0cm*3.0cm）和對仍舊片（與試件同質(zhì)性原材料，同樣尺寸，但沒有抗菌材料，且經(jīng)殺菌解決）各4片，分為4組放置4個殺菌平皿內(nèi)。
取以上菌懸液，各自在每一個被試件片和對仍舊上面滴入100uL，勻稱施膠，逐漸記時，功效2、5、10、20min，用無菌檢測鑷各自將樣照資金投入含5mL相對還原劑的試管嬰兒內(nèi)，充足攪拌，作適度稀釋液，隨后取在其中2-3個稀釋液度，各自汲取0.5mL，放置2個平皿，用涼至40-45℃的營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液（病菌）或沙氏瓊脂培養(yǎng)液（酵母）15mL作竭盡，旋轉(zhuǎn)平皿，使其充足勻稱，瓊脂凝結(jié)后旋轉(zhuǎn)平板電腦，35℃±2℃塑造48h（病菌）或72h（酵母），干活兒菌菌落計數(shù)。
試驗反復3次，按式（C1）測算除菌率：
X3 = （A-B）/A *100% （C1)
式中：X3――除菌率，%；
A――對比試品均值菌體數(shù)；
B――被使試品均值菌體數(shù)。
C3.2.2 點評規(guī)范
除菌率≥90%，商品有抑菌作用。
C4 總混性抗（抑）菌商品抗菌特性實驗方式
C4.1 操作流程
將實驗菌24小時斜坡塑造物用PBS洗下，做成菌懸液（規(guī)定的濃度值為：用100uL滴于對仍舊上面或5mL樣液內(nèi)，收購 菌數(shù)為1*104-9*104cfu/片或mL）。
取被試件片（2.0cm*3.0cm）或樣液（5mL）和對仍舊片或樣液（與試件同質(zhì)性原材料，同樣尺寸，但沒有抗菌材料，且經(jīng)殺菌解決）各4片（放置殺菌平皿內(nèi)）或4管。
取以上菌懸液，各自在每一個被試件片或樣液和對仍舊片或樣液上或內(nèi)滴加100uL，勻稱施膠/混和，逐漸記時，功效2、5、10、20min，用無菌檢測鑷各自將樣照或樣液（0.5mL）資金投入含5mL PBS的試管嬰兒內(nèi)，充足攪拌，作適度稀釋液，隨后取在其中2-3個稀釋液度，各自汲取0.5mL，放置2個平皿，用涼至40-45℃的營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液（病菌）或沙氏瓊脂培養(yǎng)液（酵母）15mL作竭盡，旋轉(zhuǎn)平皿，使其充足勻稱，瓊脂凝結(jié)后旋轉(zhuǎn)平板電腦，35℃±2℃塑造48h（病菌）或72h（酵母），干活兒菌菌落計數(shù)。
實驗反復3次，按式（C2）測算抗菌率
X4 = ( A-B ) / A * 100 （C2)
式中：X4――抗菌率，%；
A――對比試品均值菌體數(shù)；
B――被試試品均值菌體數(shù)。
C4.2 點評規(guī)范
抗菌率≥50%-90%，商品有殺菌作用，抗菌率≥90%，商品有較強殺菌作用。
C5 非溶出性抗（抑）菌商品抗菌特性實驗方式
C5.1 操作流程
稱量被試件片（裁成1.0cm*1.0cm尺寸）0.75g散裝包好。
將0.75g重樣照放進一個250ML的三角燒瓶中，各自添加70mL PBS和5mL菌懸液，使菌懸液在PBS中的濃度值為1*104-9*104cfu/ mL。
將三角燒瓶固定不動于震蕩搖床邊，以300r/min振搖1h。
取0.5mL振搖后的樣液，或用PBS做適度稀釋液后的樣液，以瓊脂竭盡法打疫苗平皿，開展菌落計數(shù)。
另外設對仍舊片組和不用樣照組，對仍舊片組的對仍舊片與被試件片一樣尺寸但沒有抑菌成份，別的操作流程均與被試件片組同樣，不用樣照組各自取5mL菌懸液和70mL PBS添加一個250ML三角燒瓶中，攪拌，各自于0時間和震蕩1h后，各取0.5mL菌懸液與PBS的溶液做適度稀釋液，隨后開展菌落計數(shù)。
實驗反復3次，按式（C3）計算抑菌率：
X5 = （A ? B）/A * 100% (C3)
式中： X5――抑菌率，%；
A――被試試品震蕩前均值菌體數(shù)；
B――被試試品震蕩后均值菌體數(shù)。
C5.2 點評規(guī)范
不用樣照組的菌體數(shù)在1*104-9*104cfu/ mL中間，且試品震蕩前后左右均值菌體數(shù)誤差在10%之內(nèi)，實驗合理；被試件片組抑菌率與對仍舊片組抑菌率的誤差＞26%，商品具備抑菌功效。
C6 穩(wěn)定性測試方式
C6.1 檢測標準
C6.1.1 當然備用：將原包裝試品置室內(nèi)溫度下最少1年，半年開展抑菌或除菌功能測試。
C6.1.2 加快實驗：將原包裝試品置54-57℃恒溫箱內(nèi)14天或37-40℃恒溫箱內(nèi)3個月，維持空氣濕度＞75%，開展抑菌或除菌功能測試。
C6.2 點評規(guī)范
商品經(jīng)當然備用，其除菌率或抑菌率做到附則C3或附則C4、附則C5中要求的指標值，商品的除菌或抑菌功效在室內(nèi)溫度下的維持時間即是當然備用時間。
商品經(jīng)54℃加快實驗，其除菌率或抑菌率做到附則C3或附則C4、附則C5中要求的指標值，商品的除菌或抑菌功效在室內(nèi)溫度下最少維持一年。
商品經(jīng)37℃加快實驗，其除菌率或抑菌率做到附則C3或附則C4、附則C5中要求的指標值，產(chǎn)品的除菌或抑菌作用在室內(nèi)溫度下最少維持二年。
（規(guī)范的附錄）
產(chǎn)品環(huán)氧乙烷含量測試標準
D1 檢測目地
明確產(chǎn)品消毒殺菌后開啟時間，當新產(chǎn)品或原料、消毒殺菌加工工藝更改很有可能危害產(chǎn)品物理化學特性時應予以檢測。
D2 試品收集
環(huán)氧乙烷消毒殺菌后，馬上從統(tǒng)一消毒殺菌生產(chǎn)批號的三個紙袋包裝中隨機抽取一定量小袋裝試品，取樣量最少應達到要求所需測量頻次的量（留一定量在必需時開展進行復測用）。
各自于環(huán)氧乙烷消毒殺菌后24小時及之后每過數(shù)日開展含量測量，直到含量降至本規(guī)范4.6所要求的指標值下列。
D3 儀器設備與實際操作標準
儀器設備：氣相色譜、氫焰探測器（FID）
柱：Choromosorb 101 HP60-80目；夾層玻璃柱長1m，Φ3nm。柱溫：120℃.
探測器：150℃。
氣化器：150℃。
載供氣量：N2：35mL/min。
氡氣：35mL/min。
氣體：350ML/min。
柱前壓約為109kPa。
D4.1 規(guī)范配置
用100mL夾層玻璃針管從純環(huán)氧乙烷小氣瓶中提取環(huán)氧乙烷標準氣體（反復放空自己二次，以清除原來氣體），塞外橡皮頭，用十米L針管提取以上100mL針管中純環(huán)氧乙烷標準氣體十米L，用氮氣稀釋到100mL（可將十米L標準氣引入到現(xiàn)有90mL氮氣的帶橡皮塞頭的針管中進行）。用一樣的方式依據(jù)必須再逐步稀釋2-3次（稀釋1000-10000倍），作三個濃度值的標準氣體。按環(huán)氧乙烷小氣瓶中環(huán)氧乙烷的純凈度、稀釋倍率和室內(nèi)溫度測算出最終標準氣中的環(huán)氧乙烷濃度值。
計算方法以下：
式中：c――標準氣體濃度值，ug/mL；
k――稀釋倍率；
t――室內(nèi)溫度，℃。
D4.2 試品解決
最少取2個最少包裝商品，將其剪下來，任意精準稱量3g，放進提純器皿中，添加5mL雙蒸水，充足混勻，置放4h或震蕩30min備用。如被檢試品為吸水樹脂原材料商品，科適度提升雙蒸水量，以保證 最少可吸出1mL樣液。
D4.3 剖析
待儀器設備平穩(wěn)后，在一樣標準下，環(huán)氧乙烷標準氣體各氣相1.0ML，待剖析試品（溶液）各氣相2uL，每一樣液平行面作2次測量。
依據(jù)保存期判定，依據(jù)峰總面積（或基線噪聲）開展定量分析測算，取均值。
D4.4 測算
以所進環(huán)氧乙烷標準氣的mg（ug）數(shù)對個人所得峰總面積（或基線噪聲）作環(huán)氧乙烷工作中曲線圖。
以試品中環(huán)氧乙烷相匹配的峰總面積（或基線噪聲）在工作中曲線圖上求取環(huán)氧乙烷的量A（ug），并且以式（D2）求取商品中環(huán)氧乙烷的含量。
式中：X――商品環(huán)氧乙烷含量，ug/g；
A――從工作中曲線圖中常查出來環(huán)氧乙烷量，ug；
M――所取試品量，g；
V（萃）――提取液容積，mL；
V（進）――進樣量，mL。
（規(guī)范的附則）
工作環(huán)境取樣與測試標準
E1 氣體取樣與測試標準
E1.1 試品收集
在動態(tài)性下開展。
房間內(nèi)總面積不超過30m2，在直線里設里、中、外三點，里、外點部位離墻1米；房間內(nèi)總面積超出30m2，設東、西、南、北、中5點，周邊4點距墻1米。
取樣時，將含營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液的平板電腦（直徑9cm）置取樣點（約桌面上高寬比），開啟平皿蓋，使平板電腦在空氣中曝露5min。
E1.2 尿培養(yǎng)
在取樣前將準備好的營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液置35℃±2℃塑造24小時，取下查驗有零污染，將環(huán)境污染培養(yǎng)液去除。
將已收集的培養(yǎng)液在6小時內(nèi)送試驗室，于35℃±2℃塑造48h觀查結(jié)果，記數(shù)平板電腦上細菌菌落數(shù)。
E1.3 菌體測算
式中：y1――空氣中細菌菌落數(shù)量，cfu/m3；
A――平板電腦上均值細菌菌落數(shù)；
S1――平板電腦總面積，cm2；
t――曝露時間，min。
E2 操作臺表層與職工手表層取樣與測試標準
E2.1 試品收集
操作臺：將經(jīng)殺菌的內(nèi)徑為5厘米*5厘米的殺菌規(guī)格型號板放到被檢物件表層，用一浸有殺菌鹽水的棉球在其中擦抹10次，隨后剪去手觸碰一部分棉簽，將棉球放進含十米L殺菌鹽水的取樣管中復檢。
E2.2 細菌菌落數(shù)量檢驗
將已收集的試品在6小時內(nèi)送試驗室，每一個取樣管充足攪拌后取1米L樣液，放進殺菌平皿內(nèi)，竭盡營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液，每一個試品平行面打疫苗二塊平皿，置35℃±2℃塑造48h觀查結(jié)果，記數(shù)平板電腦上細菌菌落數(shù)。
式中：y2――操作臺表層細菌菌落數(shù)量，cfu/cm2；
A――平板電腦上均值細菌菌落數(shù)；
S2――取樣總面積，cm2；
y3――職工手表層細菌菌落數(shù)量，cfu/支手。
E2.3 病原菌檢驗
按本規(guī)范附則B開展。
（規(guī)范的附錄）
消毒殺菌實際效果生物監(jiān)測評價方法
F1 環(huán)氧乙烷消毒殺菌
F1.1 環(huán)氧乙烷消毒殺菌實際效果點評用生物指示菌為枯草桿菌灰黑色變異芽胞（ATCC 9372）。在菌量為5*105-5*106cfu/片、環(huán)氧乙烷濃度值為600Mg/L±30mg/L、功效溫度為54℃±2℃、空氣濕度為60%±10%標準下，其消滅90%微生物所需時間D值應是2.5-5.8米in，生存時間≥7.5min，消滅時間≤58min。
F1.2 每一次檢測最少布線10片生物顯色劑，放于較難消滅處。消毒殺菌結(jié)束，取下指示菌片打疫苗鷹眼俠骨頭湯細胞培養(yǎng)液作判定檢驗或打疫苗營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液作定量分析檢驗，將沒有處理陽性對照菌片作同樣打疫苗，二者均置35℃±2℃塑造。陽性對照應在24小時內(nèi)有菌生長發(fā)育。判定塑造試品如持續(xù)觀查7天所有無菌檢測生長發(fā)育，可匯報生物顯色劑塑造呈陰性，消毒殺菌達標。定量分析塑造試品與陽性對照對比消滅指數(shù)值做到103也可匯報消毒殺菌達標。
F2 電磁波輻射消毒殺菌
F2.1 電磁波輻射消毒殺菌實際效果點評 用生物指示菌為簡短鏈球菌芽胞E601（ATCC 27142），在菌量為5*105-5*106cfu/口腔上皮細胞，其消滅90%微生物所需使用量D10值應是1.5kGy。
F2.2 每一次檢測最少選5箱，每件商品布線3片生物顯色劑，置最少使用量處。消毒殺菌結(jié)束，取下指示菌片打疫苗營養(yǎng)成分骨頭湯細胞培養(yǎng)液作判定檢驗或打疫苗營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液作定量分析檢驗，將沒有處理陽性對照菌片作同樣打疫苗，二者均置35℃±2℃塑造。陽性對照應在24小時內(nèi)有菌生長發(fā)育。判定塑造試品如持續(xù)觀查7天所有無菌檢測生長發(fā)育，可匯報生物顯色劑塑造呈陰性，消毒殺菌達標。定量分析塑造試品與陽性對照對比消滅指數(shù)值做到103也可匯報消毒殺菌達標。
F3 工作壓力蒸汽消毒
參考GB15981-1995的要求實行。
附則G
（規(guī)范的附則）
培養(yǎng)液與具體制取
G1 營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液
成份：
蛋白胨 20g
牛肉膏 4g
氧化鈉 5G
瓊脂 15g-40g
純凈水 100mL
制作方法：除瓊脂外別的成份融解于純凈水中，調(diào)pH至7.2-7.4，添加瓊脂，加溫融解，散裝試管嬰兒，121℃殺菌15min儲備用。
G2 乳清蛋白膽鹽發(fā)醇管
成份：
蛋白胨 40g
豬膽鹽（或牛、羊膽鹽） 5G
乳糖 20g
0.04%溴甲酚紫溶液 25mL
純凈水 加至100mL
制作方法：將蛋白胨、膽鹽及乳糖溶解水里，校準pH至7.4，添加顯色劑，散裝沒管五十米L，并放進一個小倒管，115℃殺菌15min，即得。
G3 乳糖發(fā)醇管
成份：
蛋白胨 40g
乳糖 20g
0.04%溴甲酚紫溶液 25mL
純凈水 加至100mL
制作方法：將蛋白胨及乳糖溶解水里，校準pH至7.4，添加顯色劑，散裝每管十米L，并放進一個小倒管，115℃殺菌15min，即得。
G4 伊紅美藍瓊脂（EMB）
成份：
蛋白胨 20g
乳清蛋白 20g
磷酸氫二鉀 3g
瓊脂 17g
2%伊紅Y水溶液 50mL
0.65%美藍水溶液 十米L
純凈水 加至100mL
制作方法：將蛋白胨、聚磷酸鹽和瓊脂融解于純凈水中，校準pH至7.1，散裝與蒸發(fā)皿內(nèi)，121℃殺菌15min預留，臨用時添加乳清蛋白并加溫融化瓊脂，冷至55℃，添加伊紅和美藍水溶液混勻，竭盡平板電腦。
G5 SCDLP 液體培養(yǎng)基
成份：
opo結(jié)構(gòu)脂胨 17 g
黃豆蛋白胨 3 g
氧化鈉 5 g
磷酸氫二鉀 2.5 g
葡萄糖 2.5 g
大豆卵磷脂 1 g
吐溫80 7 g
純凈水 1000 mL
制作方法：將各種各樣成份混和(如無opo結(jié)構(gòu)脂胨和黃豆蛋白胨能用日本多胨替代)，加溫融解，調(diào)pH至7.2～7.3，散裝，121℃殺菌20min，混勻，防止吐溫80沉到底端，冷至25℃后應用。
G6 十六烷三羥基溴化銨培養(yǎng)液
成份：
牛肉膏 3 g
蛋白胨 10 g
氧化鈉 5 g
十六烷三羥基溴銨 0.3 g
瓊脂 20 g
純凈水 1000 mL
制法：除瓊脂外，以上各成份混和加溫融解，調(diào)pH至7.4～7.6，隨后添加瓊脂，115℃滅菌20 min，冷至55℃上下傾注平皿。
G7 綠膿菌素測量用培養(yǎng)液斜坡
成份：
蛋白胨 20 g
氧化鎂 1.4 g
硫酸銨 10 g
瓊脂 18 g
凡士林(化學純) 20g
純凈水 加至1 000 mL
制法：將蛋白胨、氧化鎂和硫酸銨加到純凈水中，加溫融解，調(diào)pH至7.4，添加瓊脂和凡士林，加溫融解，散裝試管嬰兒，115℃滅菌20 min，做成斜坡預留。G8 果膠培養(yǎng)液
成份：
牛肉膏 3 g
蛋白胨 5 g
果膠 120 g
純凈水 1 000 mL
制作方法：各成份添加純凈水中泡浸20 min，加溫拌和融解，調(diào)pH至7.4，5 mL散裝試管嬰兒中，115℃ 殺菌20 min，站立做成高層住宅預留。
G9 磷酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)液
成份：
蛋白胨 10 g
酵母浸膏 3 g
硝酸鉀 2 g
亞硝酸鈉 0.5 g
純凈水 1000 mL
制作方法：將蛋白胨與酵母浸膏加到純凈水中，加溫融解，調(diào)pH至7.2，燒開過慮后補充水率，添加硝酸鉀和亞硝酸鈉融解勻稱，散裝到有小倒管的試管嬰兒中，115℃殺菌20 min預留。
G10 血瓊脂培養(yǎng)液
成份：
營養(yǎng)成分瓊脂 100 mL
脫化學纖維羊血(或兔血) 10 mL
制作方法：將殺菌后的營養(yǎng)成分瓊脂加溫融化，涼至55℃上下，用無菌檢測方式將10 mL脫化學纖維血添加后混勻，竭盡平皿置電冰箱預留。
G11 甘露醇發(fā)醇培養(yǎng)液
成份：
蛋白胨 10 g
牛肉膏 5 g
氧化鈉 5 g
甘露醇 10 g
0.2％溴麝香草酚藍水溶液 12 mL
純凈水 1000 mL
制作方法：將蛋白胨、氧化鈉、牛肉膏加到純凈水中，加溫融解，調(diào)pH至7.4，添加甘露醇和溴麝香草酚藍攪拌后，散裝試管嬰兒，115℃殺菌20 min預留。
G12 葡萄糖水骨頭湯
成份：
蛋白胨 10 g
牛肉膏 5 g
氧化鈉 5 g
葡萄糖水 10 g
純凈水 1000 mL
制作方法：以上成份溶解純凈水中，調(diào)pH至7.2～7.4，加溫融解，散裝試管嬰兒，121℃殺菌15min儲備用。
G13 兔血液
制作方法：取殺菌3.8％三聚磷酸鈉1份，兔全血4份，攪拌靜放，3 000 r/min抽濾5 min，取上清，棄血球。
G14 沙氏瓊脂培養(yǎng)液
蛋白胨 10 g
葡萄糖水 40g
瓊脂 40g
純凈水 1000 mL
用700 mL純凈水將瓊脂融解，300 mL純凈水將葡萄糖水與蛋白胨融解，混和以上兩一部分，混勻后散裝，115℃殺菌15 min，即得。應用前，用過慮殺菌方式添加0.1g/L的氯霉素或是0.03g/L的鏈霉素。
定性實驗選用沙氏培養(yǎng)液，即除不用瓊脂外別的成份與制法跟上面一樣。
G15 營養(yǎng)成分骨頭湯培養(yǎng)液
蛋白胨 10 g
氧化鈉 5 g
牛肉膏 3 g
純凈水 1000 mL
調(diào)整pH使殺菌后為7.2～7.4，散裝，115℃殺菌30 min，即得。
G16 溴甲酚紫葡萄糖水蛋白胨水培養(yǎng)液
蛋白胨 10 g
葡萄糖水 5G
純凈水 1000 mL
調(diào)整pH至7.0～7.2，加2％溴甲酚紫酒精溶液0.6 mL，115℃ 殺菌30 min，即得。
G17 革蘭氏染色液
結(jié)晶紫上色液：
結(jié)晶紫 1 g
95％酒精 20 mL
1％草酸銨溶液 80 mL
將結(jié)晶紫融解于酒精中，隨后與草酸銨水溶液混和。
革蘭氏陽性菌碘液：
結(jié)晶紫 1 g
碘 1 g
碘化鉀 2 g
純凈水 300 mL
脫色劑
95％酒精
復染色液：
(1)沙黃復染色液：
沙黃 0.25 g
95％酒精 10 mL
純凈水 90 mL
將沙黃融解于酒精中，隨后用純凈水稀釋液。
(2)稀石炭酸復紅液
稱量偏堿復紅10g，研細，加95％酒精100ML，置放留宿，過濾紙過慮。取該液10mL，加5％石炭酸溶液90mL混和，即是石炭酸復紅液。再取此液10mL，加水90mL，即是稀石炭酸復紅液。
G18 0.03 mol/L聚磷酸鹽緩沖溶液（PBS，pH7.2）
成份：
磷酸氫二鈉 2.83 g
磷酸二氫鉀 1.36 g
純凈水 1000 mL
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